1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
203
204
205
206
207
208
209
210
211
212
213
214
215
216
217
218
219
220
221
222
223
224
225
226
227
228
229
230
231
232
233
234
235
236
237
238
239
240
241
242
243
244
245
246
247
248
249
250
251
252
253
254
255
256
257
258
259
260
261
262
263
264
265
266
267
268
269
270
271
272
273
274
275
276
277
278
279
280
281
282
283
284
285
286
287
288
289
290
291
292
293
294
295
296
297
298
Leica BOND-MAX Slide Boyama Cihazı (Tıbbi Amaçlı)
Bond Reaktiflerinin Kullanimi
13.4 Boyamanin Yorumlanmasi
immtinohistokimyasal /hucre igi hibridizasyon prosedurleri hakkmda tecrtibe sahibi kalifiye bir
patolog sonuclar uzerinde yorumlamalara gidilmeden once mutlaka kontrolleri degerlendirmelidir ve
boyama islemine tabi tutulmus tirtinti tanimlamahdir.
Antijen saptamanm duyarhhgi ve belirliligi kullanilan spesifik primer antikora baglidir. Arzu edilen
boyamanin saglanabilmesi icin, degisiklik gbsteren inkubasyon zamanlari ve/veya spesifik antikor
konsantrasyonuyla Bond sistemi uzerinde her bir spesifik antikor optimize edilmelidir. Spesifik
antikorun optimize edilmesinde basansiz olunmasi yetersiz antijen saptanmasma yol acabilir.
13.4.1 Pozitif Doku Kontrolleri
Turn reaktiflerin uygun bir bicimde islevlerini yerine getirebildiklerinden emin olabilmek icin ilk once pozitif
doku kontrolu incelenmelidir.
DAB tabanh sistemler kullanildigmda, hedef hucrelerle bir kahverengi reaksiyon uriiniinun varhgi
pozitif reaktiviteyi gbsterir (3,3' diaminobenzidine tetrachloride, DAB). Bond Polimer Kirmizi
Saptama Sistemleri kullanildigmda, hedef hucrelerle bir kirmizi reaksiyon uriiniiniin varhgi pozitif
reaktiviteyi gbsterir. Eger pozitif doku kontrolu pozitif boyama sergilemekte basansiz olursa, test
numunelerine iliskin sonuclar gecersizsayilmahdir.
13.4.2 Negatif Doku Kontrolleri
Primer antikor/prob tarafmdan hedef antijenin/ntikleik asitin etiketlenmesinin belirliliginin
dogrulanabilmesi icin pozitif doku kontrolu sonrasmda negatif doku kontrolu yapilmahdir.
Negatif doku kontrolijndeki spesifik boyamanin yoklugu hucreler/hucresel bilesenlere antikor/prob
capraz reaktivitesinin yoklugunu dogrular.
Eger negatif harici doku kontrolunde spesifik boyama ortaya cikarsa (yanhs pozitif boyama),
sonuclar gecersiz olarakdusiiniilebilir. Eger mevcutsa, belirli olmayan boyama, genellikle bir
dagilmis gbrtinume sahiptir. Bagdoku'nun sporadik boyamasi yogun formalin sabit dokulan
kesitlerinde gbzlenebilir. Boyama sonuclannin yorumlanabilmesi icin bozulmamis hucreler
kullanilmahdir. Nekrotikveya bozulmaya ugramis hucreler coklukla belirsiz bir bicimde boyanirlar.
13.4.3 Hasta Dokusu
Primer antikor/prob ile en son boyanan hasat numuneleri incelenmelidir.
Pozitif boyama yogunlugu negatif reaktif kontroliiniin herhangi bir belirli olmayan arka plan
boyamasi cercevesinde degerlendirilmelidir. Herhangi bir immuniihistokimyasal/ hucre igi
hibridizasyon testiyle bir negatif sonuc incelenen dokuda veya hucrelerde antijen/ntikleik asidin
olmamasi degil, antijen/ntikleik asidin saptanamamasi anlamina gelir.
Egergerekliyse, yanhs pozitif reaksiyonlann belirlenebilmesi icin antikorlann bir panelini kullanmiz.
Leica Bond Kullamm Kilavuzu Rev H01 © Leica Biosystems Melbourne 2009 256