1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
203
204
205
206
207
208
209
210
211
212
213
214
215
216
217
218
219
220
221
222
223
224
225
226
227
228
229
230
231
232
233
234
235
236
237
238
239
240
241
242
243
244
245
246
247
248
249
250
251
252
253
254
255
256
257
258
259
260
261
262
263
264
265
266
267
268
269
270
271
272
273
274
275
276
277
278
279
280
281
282
283
284
285
286
287
288
289
290
291
292
293
294
295
296
297
298
Leica BOND-MAX Slide Boyama Cihazı (Tıbbi Amaçlı)
Protokoller
10. On boyama protokolleri icin adim sicakhklan asagidaki tabloda verilen arahklarda olmahdir:
Protokol Adimi Sicakhk Arahgi (°C)
Finnlama ve Dewax, finnlama 30-80
adimi
Isil On Islem 35 -100
Enzim On Islemi 35 -100
Denaturation (Denaturasyon) 70 -100
Hybridization (Hibridizasyon) 37 -45
11. Adim inkubasyon sureleri asagidaki tablodaki arahklarda olmahdir. Bu arahklarzorunlu degildir:
Protokol Adimi Inkubasyon Arahgi (dakika)
Finnlama ve Dewax, finnlama 1-55
adimi
Isil on islemi (adimlar 1 ve 2) 0-15
Isil on islemi (adimlar 3 ve 4) 5-30
Enzim on islemi (adim 1) 0
Enzim on islemi (adim 2 ve 3,15 5-15
dakika)
Denaturation (Denaturasyon) 5-20
Hybridization (Hibridizasyon) 20-950
Boyama protokolleri, reaktif 0-60
adimlan
Boyama protokolleri, yikama 0-55
adimlan
Genel olarak, reaktif uygulama adimlan icin, Leica Microsystems 30 dakikadan daha uzun
inkubasyon surelerini bnermemektedir. Eger daha uzun surelergerekliyse, ayni reaktifi
uygulamak icin tekrarlanmis/kopyalanmis adimlar olusturulmahdir (bakmiz sayfa 160 "Bir
Reaktif Adimmin Tekrarlanmasi").
12. Her bir adim sicakhk, inkubasyon sureleri (uygulanabildigi kisimlarda) ve bir reaktif ile tarn
olarak tanimlanmahdir.
13. Her bir protokol icin sadece bir karma reaktif (ornegin karma DAB) kullanimma izin vardir. Ardisik
ikili boyama isleminde, iki protokolun her biri icin bir kanstirma adimma izin verilmektedir.
14. Kanstirilmis reaktif sadece iki adim icin kullamlabilmektedir.
8.4.3 Protokollerin igeriye Aktanlmasi
Import (igeriye aktarim) islevi ancak Bond-max (veya Bond-x) ile kombine Bond-IH'e sahipseniz
gecerli olabilir.
iceriye aktarim bir mevcut sisteme bir yeni cihaz tipi eklendiginde kullanihr. Ornegin, eger sadece
Bond-max ve/veya Bond-x isleme modiillerine sahip bir sisteme bir Bond-Ill eklenirse, kullanici
protokollerinin Bond-Ill versiyonlan mevcut olmayacaktir. Bond-Ill sekmesinin protokol adimlanni
doldurabilmek icin asagidaki adimlar tamamlanmahdir:
1. Bond-Ill uzerinde kullanmak istediginiz Bond-x veya Bond-max protokoliinii Protocol setup
(Protokol kurulumu) ekranmdan seciniz ve Open (Ag) uzerine tiklaymiz.
2. Bond-Ill sekmesini seciniz ve Import uzerine tiklaymiz.
Leica Bond Kullamm Kilavuzu Rev H01 © Leica Biosystems Melbourne 2009 162