Leica BOND-MAX Slide Boyama Cihazı (Tıbbi Amaçlı)
Bond Reaktiflerinin Kullanimi (iii) Sadece IHC icin, primer antikor konsantrasyonunun arttinlmasi. Bond Polimer Kirmizi Saptama Sistemleri (Bond Polymer Red Detection Systems) iki Bond Polimer Kirmizi Saptama Sistemi mevcuttur: • Bond Polimer Ratine Kirmizi Saptama (Bond Polymer Refine Red Detection): Bu saptama sistemi vucutdisi kullanim icindir. • Bond Polimer AP Kirmizi Saptama (Bond Polymer AP Red Detection): Bu saptama sistemi sadece arastirma kullanimi icindir. Bond Polimer Kirmizi Saptama Sistemleri, yukanda aciklanan DAB bazh polimer saptama sistemleri ile ayni avantajlara sahiptir ancak gbruntiileme icin DAB yerine Fast Red chromogen (Hizli Kirmizi kromojen) kullanihr. Bu sistem, DAB icin doku pigmentlerinin yanilabilecegi deri gibi dokular uzerinde kullanima uygundur. Her iki saptama sistemi de hematoksilin tersboyamanin (bluing dahil) yam sira parlak fusya kirmizisi immunoboyama saglayan alkalin fosfataza konjuge edilmis oldukca yiiksek hassasiyetli kompakt bir polimer sistemi saglar. Fast Red kromojen kimyasal olarak normal laboratuar kosullannda kararsizdir. Etkinliklerini saglamak amaciyla Bond Polimer Kirmizi Saptama Sistemleri icin kullamci talimatlanni ciddiyetle takip ediniz. Sistemde herhangi bir bozulmanm hizli birsekilde saptanmasma izin vermek amaciyla kontrol dokusunu herzaman hasta dokusu ile ayni lam uzerine yerlestiriniz. Her iki Bond Polimer Kirmizi Saptama sistemi icin adimlar asagidaki gibidir: 1. Ozel primer antikor uygulamasi. 2. Baglayici post primer antikor ile inkubasyon 3. Polimer alkalin fosfataz (AP) - sekonder antikor esleniklerini kapsayan polimer reaktif ile inkubasyon. 4. Kompleksin kirmizi bir cbkelti vasitasiyla substrat kromojen, Fast Red ile gbruntiilenmesi. 5. Kromojen tammlama yikamasi (sadece Bond Polimer Ratine Kirmizi Saptama icin) 6. Hticre cekirdeginin saptanmasma imkan veren hematoksilin ters boyama (hematoxylin counterstaining). Sonuclann inkubasyonu, yikanmasi ve yorumlanmasi, Bond Etiketlenmis Streptavidin-Biotin Saptama Sistemleri icin aciklandigi gibi gerceklestirilir. Bond Etiketlenmis Streptavidin-Biotin Saptama Sistemi (DAB) Bu kategoride bir saptama sistemi bulunmaktadir: Bond Intense R Detection (Bond Yogun R Saptama). DAB bazh saptama sistemi asagidaki gibi cahsir: 1. Endojen peroksidaz aktiviteyi sbndurmek icin hidrojen peroksit ile inkubasyon. 2. Ozel primer antikor uygulamasi. 3. Bu antikorun yeri, bunlarm primer antikorlanm tamyan, kullamci tarafmdan saglanan biotin birlesmeli sekonder antikor formiilasyonu tarafmdan belirlenir. 4. Sekonder antikor uzerinde mevcut olan biotine baglanan bir streptavidin enzimi esleniginin ilavesi. Leica Bond Kullanim Kilavuzu Rev H01 © Leica Biosystems Melbourne 2009 246