Bond Reaktiflerinin Kullanimi
IHC igin malzemeler
IHC IHC testleri icin yukarida Hstelenen malzemelere Have olarak asagidakiler de gereklidir:
• Primer antikorlara bzel negatif kontrol reaktifleri (sayfa 251 "Kalite Kontrolu" kismma bakmiz)
• Boyama kavanozlan veya banyolan [Bond-x]
• Primer antikorlara bzgti epitop geri kazanim malzemeleri [Bond-x]
• Bond Epitope Geri kazanim Solusyonu 1 (Katalog No. AR9961) [Bond-Ill ve Bond-max]
• Bond Epitope Geri kazanim Solusyonu 2 (Katalog No. AR9640) [Bond-Ill ve Bond-max]
• Bond kullanima hazir primer antikorlan veya 7 mL (OP79193) veya 30 mL (OP309700) Bond Acik
Konteynerleri icerisinde Bond Primer Antikor Seyrelticisinde (Katalog No. AR9352) seyreltilmis
primer antikorlan
• Lam uzerine yerlestirme ortami, recine bazh veya su bazh
• Bond Lam Hazirlama Tepsisi, opsiyonel (Katalog No. S21.1970.110).
• Titrasyon kiti, opsiyonel (asagidaki "Titrasyon Kiti" kismma bakmiz)
ISH igin malzemeler
ISH ISH testleri icin yukarida Hstelenen ortak malzemelere Have olarak asagidakiler de gereklidir:
• ISH problan
• Anti Floresin Antikor (Katalog AR0833)
• ISH'ye bzgti pozitif ve Negatif Kontrol Problan (sayfa 251 "Kalite Kontrolu" kismma bakmiz)
Titrasyon Kiti
IHC Bond Titrasyon kiti 10 bos konteyner ve 50 ilaveden (6 mL) meydana gelir ve Bond sistemi icin primer
antikorlarm konsantrasyonunu optimize ederken kullanihr. Her bir primer antikor konsantrasyonunun
ktictik miktarlan hazirlanip ilaveler icerisine konulabilir. Her bir konteyner toplam 40 mL reaktif icin
kullanilabilir.
Konsantre edilmis antikorlarm titrasyonu iki kath seri dilusyonlar kullanilarak elde edilebilir.
Asagidaki ybntem 150 uL tekli dagitim icin seri diliisyonlann nasil hazirlandigmi aciklamaktadir.
1. Uc ilaveyi her bir antikor icin uygun dilusyon He etiketleyiniz.
2. 700 uL'lik ilk Have icerisinde bir baslangic dilusyonu yapmiz.
3. Nave 2 ve Have 3 icerisine 350 uL Bond Primer Antikor Dilusyonunu dagitmiz.
4. Baslangic dilusyonundan 350 uL'yi Have 2'ye aktanniz ve nazikce kanstirmiz.
5. Nave 2'den 350 uL'yi Have 3'e aktanniz ve nazikce kanstirmiz.
Leica Bond Kullamm Kilavuzu Rev H01 © Leica Biosystems Melbourne 2009 249