Kullanım Kılavuzları
13 Bond Reaktiflerinin Kullanimi 13.1 Bu Prosediiriin ilkeleri Immunohistokimya (Immunohistochemistry - IHC) En az 50 senedir hucreler igerisindeki ozel antijenleri ve dokulan saptamak icin immunohistokimya teknikleri kullamlmaktadir. Floresan etiketleri kullanan ilk raporlanmis metot 194^ yilmdandir. Sonradan peroksidaz gibi enzimlertanitilmistir2. immunohistokimya gunumuzde rutin H & E parafin boyalannin yam sira hucre tanimayi kolaylastirmak icin kullanilmakta olup normal ve anormal hucrelerin tanmmasi icin biryardimcidir. Klasik ybntemler kesin birteshis saglamada tek basma basansiz oldugunda, immunohistokimya ybntemleri cerrahi patolojide "standart ilgilenme" ybntemi olmuslardir. Ancak, cogalabilirlik ile ilgili olarak hemen hemen universal benimsemeye ragmen bazi on kosullar bulunmaktadir. Otomatiklestirilmis BondTM sistemi uzerindeki reaktiflerjmmunohistokimya teknikleri vasitasiyla doku kesitleri icerisindeki antijenleri gbsterirler. Ozet olarak bzel bir primer antikor bir kesite baglanmistir, daha sonra Bond saptama sistemi reaktifleri karmasikhgi gbz oniine getirirler. Hucre ici Hibridizasyon (In Situ Hybridization - ISH) Molekuler biyoloji teknikleri hastahk aniayisimizi btiyuk blcude gelistirmistir. Hucre ici hibridizasyon hem molekuler biyolojiyi hem de histolojiyi birlestirir ve bunlann hticresel kapsami icindeki DNA veya RNA'nm gbrsellestirilmesine izin verirler. Nukleik asit saptama ilk olarak 19696 yilmda tanitildigmdan, hucre ici hibridizasyon protokolleri bunu klinik pataloji ve ayni zamanda arastirma icin gittikce artan degerli bir arac haline getirmistir. Hticre ici hibrididazyon; DNA ve RNA icindeki ntikleotid bazlann tumleyici baglanimmi kullanirlar. Etiketlenmis bir nukleik asit probu, bzellikle sabit doku veya hticre numunesi icerisindeki tamamlayici bblumiine baglanir. Bu prob, Bond polimer saptama reaktifleri tarafmdan takip edilen etikete karsi bir antikor uygulamasi vasitasiyla gbriiniir hale getirilir. Otomatiklestirilmis Bond sistem ve reaktifleri, hantal el ile yapilan tekniklerin yerine gtivenilirve etkili bir alternatif sunarlar. Leica Bond Kullamm Kilavuzu Rev H01 © Leica Biosystems Melbourne 2009 244