13
Bond Reaktiflerinin Kullanimi
13.1 Bu Prosediiriin ilkeleri
Immunohistokimya (Immunohistochemistry - IHC)
En az 50 senedir hucreler igerisindeki ozel antijenleri ve dokulan saptamak icin immunohistokimya
teknikleri kullamlmaktadir. Floresan etiketleri kullanan ilk raporlanmis metot 194^ yilmdandir.
Sonradan peroksidaz gibi enzimlertanitilmistir2. immunohistokimya gunumuzde rutin H & E parafin
boyalannin yam sira hucre tanimayi kolaylastirmak icin kullanilmakta olup normal ve anormal
hucrelerin tanmmasi icin biryardimcidir. Klasik ybntemler kesin birteshis saglamada tek basma
basansiz oldugunda, immunohistokimya ybntemleri cerrahi patolojide "standart ilgilenme" ybntemi
olmuslardir. Ancak, cogalabilirlik ile ilgili olarak hemen hemen universal benimsemeye ragmen bazi
on kosullar bulunmaktadir.
Otomatiklestirilmis BondTM sistemi uzerindeki reaktiflerjmmunohistokimya teknikleri vasitasiyla
doku kesitleri icerisindeki antijenleri gbsterirler. Ozet olarak bzel bir primer antikor bir kesite
baglanmistir, daha sonra Bond saptama sistemi reaktifleri karmasikhgi gbz oniine getirirler.
Hucre ici Hibridizasyon (In Situ Hybridization - ISH)
Molekuler biyoloji teknikleri hastahk aniayisimizi btiyuk blcude gelistirmistir. Hucre ici hibridizasyon
hem molekuler biyolojiyi hem de histolojiyi birlestirir ve bunlann hticresel kapsami icindeki DNA
veya RNA'nm gbrsellestirilmesine izin verirler. Nukleik asit saptama ilk olarak 19696 yilmda
tanitildigmdan, hucre ici hibridizasyon protokolleri bunu klinik pataloji ve ayni zamanda arastirma
icin gittikce artan degerli bir arac haline getirmistir.
Hticre ici hibrididazyon; DNA ve RNA icindeki ntikleotid bazlann tumleyici baglanimmi kullanirlar.
Etiketlenmis bir nukleik asit probu, bzellikle sabit doku veya hticre numunesi icerisindeki
tamamlayici bblumiine baglanir. Bu prob, Bond polimer saptama reaktifleri tarafmdan takip edilen
etikete karsi bir antikor uygulamasi vasitasiyla gbriiniir hale getirilir. Otomatiklestirilmis Bond sistem
ve reaktifleri, hantal el ile yapilan tekniklerin yerine gtivenilirve etkili bir alternatif sunarlar.
Leica Bond Kullamm Kilavuzu Rev H01 © Leica Biosystems Melbourne 2009 244