Bond Reaktiflerinin Kullanimi
13.3.3 IHC icin Negatif Reaktif Kontrolu
IHC Belli birozelligi olmayan boyamanin degerlendirilebilmesi ve belirli boyamanin daha iyi bir bicimde
yorumlanabilmesi icin her bir hasta numunesinin bir kesiti ile birincil antikorun yerine IHC icin
negatif reaktif kontrolu kullanilmahdir.
• Tavsiye edilen ideal kontrol reaktifi:
(i) Monoklonal antikorlar icin doku kulturu suziintusiinden (supernatant) uretilen ayni iztopun
bir antikorunu kullanmiz ve ayni yol primer antikor icin de gecerlidir, ancak bu insan
dokulan icin herhangi bir belirli reaktivite gbstermez.
Ozdes seyreltici kullanilarak primer antikor olarak bunu ayni immiinoglobulin veya protein
konsantrasyonuna seyreltiniz (Bond Primary Antibody Diluent, Catalog No. AR9352).
Eger fetal calf serum islem sonrasmda temiz antikor icinde tutulabilmisse, ayni
seyrelticideki seyreltik primer antikor ile esit bir protein konsantrasyonundaki fetal calf
serum da ayni sekilde kullanim icin uygundur.
(ii) Ozdes seyreltici kullanilarak (Bond Primary Antibody Diluent, Catalog No. AR9352),
primer antikor olarak ayni protein konsantrasyonundan ve ayni hayvansal kaynaktan
gelen normal veya bagisik olmayan serumun bir immiinoglobulin parcasi (veya eger
uygunsa turn serum) poliklonal antikorlar icin kullanilmahdir.
• Aciklanan negatif reaktif kontrolleri yerine daha az arzu edilen bir alternatif olarak tek basma Bond
Primary Antibody Diluent kullanilabilir.
• Negatif reaktif kontrolu icin inkubasyon periyodu birincil antikora karsihk gelmelidir.
• Verilen primer antikor icin uygulanan her bir geri kazanim yonteminde (geri kazanim olmayanlar da
dahil) ayri bir negatif reaktif kontrol lami kullanilmahdir.
• Seri kesitlerde cesitli antikorlann panelleri kullanildigmda, bir lamm negatif boyama alanlan diger
antikorlar icin negatif/belirli bir bzelligi olmayan baglama arka plan kontrolleri olarak hizmet edebilir.
• Spesifik immunreaktiviteden gelen enzimlerin belirli olmayan baglanmalan veya endojen enzim
aktivitesini ayirt edebilmek icin; Have hasta dokulan bzel olarak substrat-kromojen veya enzim
kompleksleri ve substrat-kromojen ile boyanmahdir.
• Bond sistemi "*Negative" olarak isimlendirilen bir default negatif IHC kontrol reaktifi icerir. Bu negatif
reaktif herhangi bir IHC protokolu icin isaretleyici olarak secilebilir ve dagitilan reaktif deiyonize su
veya Bond Wash olmahdir.
Dagitilacakolan reaktif yetkili servis personeli tarafmdan ayarlanabilir; ancak, ayarlan
Opsiyonlartablosundan ayarlayabilirsiniz (bakmiz "OpsiyonlarTablosu" sayfa 94).
Bblum Anahtar Deger Dagitimlar
General PABReplacem 1 Deiyonize su
(Genel) ent (PAB
Degistirme)
2 Bond Yikama (sistemde
tanimh -default)
Leica Bond Kullanim Kilavuzu Rev H01 © Leica Biosystems Melbourne 2009 253